Obecne metody zwalczania ognisk wysoce zjadliwej ptasiej grypy (HPAI) u drobiu polegają na wyeliminowaniu i prewencyjnym uboju, co może prowadzić do dużych strat ekonomicznych i wywołać opór etyczny. Szczepienia interwencyjne mogą być alternatywą , ponieważ szczepienie jest jednym z najskuteczniejszych i najbardziej opłacalnych środków ochrony drobiu przed zakażeniem HPAI, zapobiegając rozprzestrzenianiu się na inny drób i znacznie zmniejszając potencjalną transmisję na ludzi.
Obecne konwencjonalne szczepionki inaktywowane przeciwko AI mogą być przydatne do zwalczania epidemii AI, ale nie spełniają wszystkich celów idealnej szczepionki przeciwko AI, w tym masowego zastosowania i szybkiego początku odporności. Naszym celem było dalsze zbadanie potencjału Herpesvirus of Turkeys (HVT) jako wektora zawierającego rekombinowaną hemaglutyninę H5 z HPAI H5N1.
Ten wektor HVT-H5 analizowano in vitro, testowano pod kątem początku odporności przeciwko prowokacji AI, zakresu ochrony, zmniejszenia wydalania wirusa i indukcji odpowiedzi zarówno przeciwciał, jak i komórek u niosek SPF lub kurcząt brojlerów zawierających przeciwciała matczyne (MDA+).
W warstwach SPF HVT-H5 zapewniał pełną ochronę przed śmiertelną prowokacją z 4 antygenowo zróżnicowanymi szczepami HPAI H5N1 od 2 tygodni po szczepieniu (wpv), podczas gdy u ptaków MDA+ pełna ochrona była zapewniona od 3 wpv do homologicznej prowokacji.
- Zmniejszono również wydalanie wirusa prowokacyjnego zarówno u ptaków SPF, jak i MDA+. HVT-H5 indukował ochronne miano HI (≥4) na 11 szczepów HPAI H5N1 przy 3 tygodniach pv u 3-tygodniowych niosek SPF i na HPAI H5N8 A/ch/Neth/14015531/2014 . Oprócz indukowania ochronnej odpowiedzi przeciwciał, HVT-H5 indukował również odpowiedź komórek T specyficzną dla grypy.
- Dane te pokazują, że szczepionka HVT-H5 wydaje się spełniać wiele kryteriów idealnej szczepionki przeciwko AI, w tym wczesny początek odporności, szeroka ochrona, zmniejszone wydalanie wirusa, ochrona w obecności AI-MDA i może być użytecznym narzędziem w walce epidemii sztucznej inteligencji na całym świecie.
- Epidemia wirusa ptasiej grypy w 1997 r. podkreśliła potencjał wysoce zjadliwego wirusa H5N1 do wywoływania poważnych chorób u ludzi.
- Dlatego potrzebne są skuteczne szczepionki przeciwko wirusom H5N1, aby przeciwdziałać potencjalnemu zagrożeniu globalną pandemią. Wcześniej opracowaliśmy szybko działającą i skuteczną szczepionkę przeciwko wirusowi Ebola (EBOV) przy użyciu platformy wirusa pęcherzykowego zapalenia jamy ustnej (VSV). W tym badaniu wygenerowaliśmy rekombinowane wektory wirusa grypy H5N1 oparte na VSV, aby zademonstrować wykonalność tej platformy dla szybko działającej szczepionki przeciwko wirusowi grypy pan-H5.
- Wybraliśmy wiele podejść dotyczących projektowania antygenów i lokalizacji genomu, aby zdefiniować bardziej zoptymalizowane podejście do szczepionki. Po odzyskaniu i scharakteryzowaniu in vitro konstruktów wirusa grypy H5N1 opartych na VSV, myszy zaszczepiono pojedynczą dawką lub schematem szczepienia pierwotnego/przypominającego, a następnie prowokacji śmiertelną dawką homologicznego wirusa H5 kladu 1. Stwierdziliśmy, że pojedyncza dawka wektorów VSV wyrażających pełnej długości hemaglutyninę (HAfl) była wystarczająca do zapewnienia 100% ochrony.
- Wektory szczepionkowe działały szybko, co wykazano przez jednorodną ochronę po podaniu 3 dni przed śmiertelną prowokacją. Co więcej, pojedyncze szczepienie indukowało krzyżowo ochronne przeciwciała swoiste dla H5 i chroniło myszy przed śmiertelną prowokacją różnymi wirusami kladu 2 H5, podkreślając potencjał HAfl opartego na VSV jako szczepionki ratunkowej przeciwko wirusowi grypy pan-H5.
Uzyskano szybkie, łatwe i selektywne wykrywanie przeciwciał przeciwko podtypowi H5 wirusa ptasiej grypy (AIV) w surowicy za pomocą testu immunologicznego polaryzacji fluorescencyjnej (FPIA). Wytworzono fragment rekombinowanej hemaglutyniny AIV podtypu H5 i wyznakowano fluoresceiną w celu wykorzystania jej jako znakowanego antygenu w FPIA. Ten znakowany antygen zmieszano z surowicami anty-AIV (podtypy H1-H16) i zmierzono FP mieszaniny za pomocą przenośnego analizatora FP na mikrourządzeniu. Stwierdzono, że FP wzrastało proporcjonalnie do stężenia przeciwciała anty-H5 AIV (surowica) i było znacznie wyższe niż FP uzyskane z innymi surowicami. Potwierdzono selektywne wykrywanie przeciwciała anty-H5 podtyp AIV. Wymagana objętość oryginalnej próbki wynosiła 2 µl, a czas analizy mieścił się w ciągu 20 min. Ten system wykrywania realizuje skuteczną diagnostykę na miejscu i nadzór nad AIV.
Epidemia wirusa ptasiej grypy w 1997 r. podkreśliła potencjał wysoce zjadliwego wirusa H5N1 do wywoływania poważnych chorób u ludzi.
Dlatego potrzebne są skuteczne szczepionki przeciwko wirusom H5N1, aby przeciwdziałać potencjalnemu zagrożeniu globalną pandemią. Wcześniej opracowaliśmy szybko działającą i skuteczną szczepionkę przeciwko wirusowi Ebola (EBOV) przy użyciu platformy wirusa pęcherzykowego zapalenia jamy ustnej (VSV). W tym badaniu wygenerowaliśmy rekombinowane wektory wirusa grypy H5N1 oparte na VSV, aby zademonstrować wykonalność tej platformy dla szybko działającej szczepionki przeciwko wirusowi grypy pan-H5.
Wybraliśmy wiele podejść dotyczących projektowania antygenów i lokalizacji genomu, aby zdefiniować bardziej zoptymalizowane podejście do szczepionki. Po odzyskaniu i scharakteryzowaniu in vitro konstruktów wirusa grypy H5N1 opartych na VSV, myszy zaszczepiono pojedynczą dawką lub schematem szczepienia pierwotnego/przypominającego, a następnie prowokacji śmiertelną dawką homologicznego wirusa H5 kladu 1. Stwierdziliśmy, że pojedyncza dawka wektorów VSV wyrażających pełnej długości hemaglutyninę (HAfl) była wystarczająca do zapewnienia 100% ochrony.
Wektory szczepionkowe działały szybko, co wykazano przez jednorodną ochronę po podaniu 3 dni przed śmiertelną prowokacją. Co więcej, pojedyncze szczepienie indukowało krzyżowo ochronne przeciwciała specyficzne dla H5 i chroniło myszy przed śmiertelną prowokacją różnymi wirusami kladu 2 H5, podkreślając potencjał HAfl opartego na VSV jako szczepionki ratunkowej przeciwko wirusowi grypy pan-H5.
Zakażenie wirusem ptasiej grypy (AIV), wywołane przez wirus grypy typu A, jest zakaźną, ostrą chorobą układu oddechowego ptaków związaną z epidemiami grypy na całym świecie. Wysoce zjadliwy podtyp AIV H5N1 przekroczył bariery gatunkowe, aby zarażać ssaki, w tym ludzi, ze skutkiem śmiertelnym i zwrócił uwagę jako potencjalne zagrożenie pandemiczne. Szybkie i terminowe wykrycie u drobiu jest niezwykle ważne, aby zapobiec rozprzestrzenianiu się wirusa. Pomimo dużej czułości konwencjonalne metody wykrywania, takie jak reakcja łańcuchowa polimerazy z odwrotną transkrypcją w czasie rzeczywistym oraz test strącania w żelu agarowym, są czasochłonne i pracochłonne oraz wymagają specjalnego przeszkolenia .
W tej pracy urządzenie immunowall zostało ocenione jako łatwiejszy i szybszy sposób wykrywania hemaglutyniny AIV H5 (AIV H5-HA). Do wykrywania, jako przeciwciało znakujące w teście immunologicznym typu „sandwich” zastosowano znakowane fluorescencyjnie lub znakowane enzymatycznie przeciwciało.
Ag Rapid AIV Ag Test Kit |
|||
RG15-01 | Bionote | 1 box/30 tests | 320.4 EUR |
Bionote Rapid AIV Ag_NDV Ag Test Kit |
|||
RG15-09 | Bionote | 1 box | 197.42 EUR |
Anigen Rapid FIV Ab/FeLV Ag Test Kit |
|||
RC12-04-DD | Bionote | 10 tests/Kit | 182.64 EUR |
Anigen Rapid FIV Ab Test Kit |
|||
RB22-01-DD | Bionote | 10 tests/Kit | 155.76 EUR |
Ag rapid CDV Ag Test Kit |
|||
RG11-03 | Bionote | 1 box | 165.84 EUR |
Ag Rapid H5AIV Ag test kit |
|||
RG15-05 | Bionote | 1 box | 555.6 EUR |
Rapid PED Ag Test Kit |
|||
RG14-01 | Bionote | 1 box | 191.88 EUR |
Ag Rapid CIRD-3 Ag Test Kit |
|||
RG11-09 | Bionote | 1 box | 148.37 EUR |
Rapid TGE/PED Ag Test Kit |
|||
RG14-03 | Bionote | 1 box | 289.02 EUR |
Ag Rapid Bov. TB Ab Test Kit |
|||
RB23-02 | Bionote | 1 box | 174 EUR |
Ag Rapid FMD NSP Ab Test Kit |
|||
RB28-02 | Bionote | 1 box | 130.22 EUR |
Dynamiker Monkeypox Virus Ag Rapid Test |
|||
DNK-2114-1 | Dynamiker Biotechnology | 20 tests | 702 EUR |
AIV Ag ELISA kit (96wells) |
|||
EB45-02-96 | Bionote | 1 kit | 444.72 EUR |
PCRAgH5 AIV Detection Test Kit |
|||
PD55-02 | Bionote | 1 kit | 1082.96 EUR |
Panbio™ COVID-19 Ag Rapid Test Device |
|||
41FK10 | Abbott | 25 Tests/Kit | 115.2 EUR |
Avian Influenza H5 Virus Antigen Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092014-40tests | Abbexa | 40 tests | 585.6 EUR |
Avian Influenza H5 Virus Antibodies Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092031-50tests | Abbexa | 50 tests | 585.6 EUR |
Avian Influenza H5 Virus Antibody (AIV-H5-Ab) ELISA Kit |
|||
abx364811-96tests | Abbexa | 96 tests | 764.4 EUR |
Melamine Rapid Test Kit |
|||
abx092011-50tests | Abbexa | 50 tests | 444 EUR |
NDV rapid test kit |
|||
RG15-03 | Bionote | 1 box | 166.86 EUR |
Panbio™ COVID-19 Ag Rapid Test Device (Nasal) |
|||
41FK11 | Abbott | 25 Tests/Kit | 114 EUR |
Melamine (MEL) Rapid Test Kit |
|||
abx092057-50tests | Abbexa | 50 tests | 444 EUR |
Clenbuterol (CLE) Rapid Test Kit |
|||
abx092058-50tests | Abbexa | 50 tests | 292.8 EUR |
Ractopamine (RAC) Rapid Test Kit |
|||
abx092059-50tests | Abbexa | 50 tests | 292.8 EUR |
Salbutamol (SAL) Rapid Test Kit |
|||
abx092060-50tests | Abbexa | 50 tests | 292.8 EUR |
Tetracycline (TCs) Rapid Test Kit |
|||
abx092063-50tests | Abbexa | 50 tests | 477.6 EUR |
Sulfonamides (Sas) Rapid Test Kit |
|||
abx092064-40tests | Abbexa | 40 tests | 477.6 EUR |
Quinolones (QNs) Rapid Test Kit |
|||
abx092065-40tests | Abbexa | 40 tests | 477.6 EUR |
Ciprofloxacin (CPFX) Rapid Test Kit |
|||
abx092066-50tests | Abbexa | 50 tests | 477.6 EUR |
Quinolones (QNs) Rapid Test Kit |
|||
abx092067-40tests | Abbexa | 40 tests | 477.6 EUR |
Brucella Antibody Rapid Test Kit |
|||
abx092069-40tests | Abbexa | 40 tests | 427.2 EUR |
Rapid Leishmania Ab Test Kit |
|||
RB2104 | Bionote | 1 box | 152.4 EUR |
IBD rapid test strip |
|||
RG15-04 | Bionote | 10 boxes | 177.6 EUR |
Rabies rapid test strip |
|||
RG18-01 | Bionote | 10 boxes | 182.3 EUR |
Purified Dog CRP | AG-40CRP |
|||
AG-40CRP | Immunology Consultants Laboratory | 1.0 mg | 1120 EUR |
Accu-Tell COVID-19 IgG/IgM Rapid Test |
|||
GEN-B352-20tests | Accu test | 20 tests | 283.2 EUR |
Accu-Tell COVID-19 IgG/IgM Rapid Test |
|||
GEN-B352-40tests | Accu test | 40 tests | 385.2 EUR |
Purified Bovine CRP- Recombinant | AG-10CRP |
|||
AG-10CRP | Immunology Consultants Laboratory | 1.0 mg | 1423 EUR |
Clenbuterol Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092040-50tests | Abbexa | 50 tests | 326.4 EUR |
Ractopamine Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092042-50tests | Abbexa | 50 tests | 360 EUR |
Salbutamol Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092043-50tests | Abbexa | 50 tests | 410.4 EUR |
Chloramphenicol Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092045-50tests | Abbexa | 50 tests | 427.2 EUR |
Quinolones Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092046-50tests | Abbexa | 50 tests | 644.4 EUR |
Sulfonamides Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092047-50tests | Abbexa | 50 tests | 661.2 EUR |
Tetracycline Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092048-50tests | Abbexa | 50 tests | 560.4 EUR |
Zearalenone Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092051-50tests | Abbexa | 50 tests | 493.2 EUR |
Deoxynivalenol Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092052-50tests | Abbexa | 50 tests | 560.4 EUR |
Deoxynivalenol Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092053-50tests | Abbexa | 50 tests | 560.4 EUR |
Aflatoxin Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092054-50tests | Abbexa | 50 tests | 477.6 EUR |
Zearalenone Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092056-50tests | Abbexa | 50 tests | 510 EUR |
Goat Brucella Antibody Rapid Test Kit |
|||
abx092070-40tests | Abbexa | 40 tests | 427.2 EUR |
Cow Brucella Antibody Rapid Test Kit |
|||
abx092071-40tests | Abbexa | 40 tests | 427.2 EUR |
Pig Parvovirus Antibody Rapid Test Kit |
|||
abx092074-50tests | Abbexa | 50 tests | 385.2 EUR |
Rapid Bovine Brucella Ab Test Kit |
|||
RB23-01-DD | Bionote | 1 kit/10 tests | 182.15 EUR |
Rapid Bovine TB Ab Test Kit |
|||
RB23-02-DD | Bionote | 1 box | 154.08 EUR |
Rapid FMD NSP Ab Test Kit |
|||
RB28-02-DD | Bionote | 1 box | 162.48 EUR |
NOVATest Antigen Rapid Kit (NOVA Test) |
|||
nCov-500 | Atlas Link Technology | 20 Tests | 162 EUR |
NOVATest IgG/IgM Antibody Rapid Test Kit (NOVA Test) |
|||
UNCOV-40 | Atlas Link Technology | 40 Tests | 115 EUR |
Procalcitonin rapid test (Colloidal Gold) |
|||
abx095264-80Units | Abbexa | 80 Units | 1144.8 EUR |
AgRapidFeLV Ag/FIV Ab Test Kit |
|||
RC12-04 | Bionote | 10 tests/kit | 204.48 EUR |
NOVATest Antigen Rapid Test Kit (For Single Use) (NOVA Test) |
|||
nCov-500-01 | Atlas Link Technology | 1T | 162 EUR |
Furaltadone Metabolite Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092035-50tests | Abbexa | 50 tests | 644.4 EUR |
Furazolidone Metabolite Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092036-50tests | Abbexa | 50 tests | 644.4 EUR |
Aminohydantoin Hydrochloride Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092037-50tests | Abbexa | 50 tests | 644.4 EUR |
Nitrofurazone Metabolite Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092038-50tests | Abbexa | 50 tests | 644.4 EUR |
Malachite Green Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092041-10tests | Abbexa | 10 tests | 360 EUR |
Phenylethanolamine A Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092044-50tests | Abbexa | 50 tests | 560.4 EUR |
Aflatoxin B1 Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092050-50tests | Abbexa | 50 tests | 444 EUR |
Aflatoxin B1 Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092055-50tests | Abbexa | 50 tests | 477.6 EUR |
Human Echovirus (ECHO) IgM Rapid Test Kit |
|||
abx092093-20tests | Abbexa | 20 tests | 326.4 EUR |
Human Toxoplasma (TOX) IgG Rapid Test Kit |
|||
abx092098-20tests | Abbexa | 20 tests | 260.4 EUR |
SARS-CoV-2 Antigen Rapid Test Kit |
|||
CoV2Ag-1 | UnScience | 1T | 9.6 EUR |
SARS-CoV-2 Antigen Rapid Test Kit |
|||
CoV2Ag-25 | UnScience | 25T/kit | 42 EUR |
COVID-19 IgG/IgM Rapid Test Kit |
|||
UNCOV-20 | UnScience | 20T/kit | 186 EUR |
2019-nCoV IgG/IgM Rapid Test Cassette (Whole Blood/Serum/Plasma) |
|||
GEN-402-25tests | All test | 25 tests | 292.8 EUR |
Fetal Fibronectin rapid test (Colloidal Gold) |
|||
abx095261-80Units | Abbexa | 80 Units | 1863.6 EUR |
Chlamydia Rapid Test Device (Swab/Urine) |
|||
173-8537306 | Abbott | 20 Tests/Kit | 300 EUR |
Human Hepatitis A Virus IgG Rapid Test Kit |
|||
abx092012-25tests | Abbexa | 25 tests | 510 EUR |
Pseudorabies Virus Antibodies Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092026-50tests | Abbexa | 50 tests | 385.2 EUR |
Canine Parvovirus Antibodies Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092032-40tests | Abbexa | 40 tests | 427.2 EUR |
Rabies Virus Antibodies Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092033-40tests | Abbexa | 40 tests | 427.2 EUR |
Clenbuterol-Ractopamine-Salbutamol Rapid Test Kit (Colloidal gold) |
|||
abx092039-40tests | Abbexa | 40 tests | 444 EUR |
Cattle and Goat Hydatid Antibody Rapid Test Kit |
|||
abx092072-40tests | Abbexa | 40 tests | 427.2 EUR |
Avian Influenza H5N1 Virus Antibody Rapid Test Kit |
|||
abx092075-40tests | Abbexa | 40 tests | 477.6 EUR |
Human Chlamydia Pneumoniae (CP) IgG Rapid Test Kit |
|||
abx092079-20tests | Abbexa | 20 tests | 309.6 EUR |
Human Chlamydia Pneumoniae (CP) IgM Rapid Test Kit |
|||
abx092080-20tests | Abbexa | 20 tests | 309.6 EUR |
Human Mycoplasma Pneumoniae (MP) IgG Rapid Test Kit |
|||
abx092081-20tests | Abbexa | 20 tests | 309.6 EUR |
Human Mycoplasma Pneumoniae (MP) IgM Rapid Test Kit |
|||
abx092082-20tests | Abbexa | 20 tests | 309.6 EUR |
Human Mycobacterium Tuberculosis (MT) IgG Rapid Test Kit |
|||
abx092084-20tests | Abbexa | 20 tests | 276 EUR |
Human Helicobacter Pylori (HP) IgG Rapid Test Kit |
|||
abx092090-20tests | Abbexa | 20 tests | 276 EUR |
Human Enterovirus 71 (EV71) IgM Rapid Test Kit |
|||
abx092091-20tests | Abbexa | 20 tests | 410.4 EUR |
Human Hantavirus (HV) IgM / IgG Rapid Test Kit |
|||
abx092094-20tests | Abbexa | 20 tests | 326.4 EUR |
Human Streptococcus Pneumoniae (SP) Antigen Rapid Test Kit |
|||
abx092096-20tests | Abbexa | 20 tests | 477.6 EUR |
Human Rubella Virus (RV) IgG Rapid Test Kit |
|||
abx092097-20tests | Abbexa | 20 tests | 260.4 EUR |
Human Rabies Virus (HRV) IgG Rapid Test Kit |
|||
abx092100-20tests | Abbexa | 20 tests | 410.4 EUR |
Human Treponema Pallidum (TP) Antibody Rapid Test Kit |
|||
abx092101-20tests | Abbexa | 20 tests | 309.6 EUR |
Purified Dog CRP - Recombinant | AG-40CRP-REC |
|||
AG-40CRP-REC | Immunology Consultants Laboratory | 1.0 mg | 1423 EUR |
1,5-Anhydroglucitol (1,5-AG) ELISA Kit |
|||
DL-1,5-AG-Ge-96 | Cusabio | 1 kit of 96 tests | 866.4 EUR |
1,5-Anhydroglucitol (1,5-AG) ELISA Kit |
|||
DLR-1,5-AG-Ge-48T | Cusabio | 48T | 690 EUR |
1,5-Anhydroglucitol (1,5-AG) ELISA Kit |
|||
DLR-1,5-AG-Ge-96T | DL Develop | 96T | 903.6 EUR |
W tym artykule wykazano, że oba te testy są łatwiejsze i szybsze w wykrywaniu w porównaniu z konwencjonalnym zestawem do testu immunoenzymatycznego (ELISA). Ponadto osiągnięto wysoką selektywność wykrywania AIV H5-HA po ocenie innych różnych podtypów wirusa HA. Granica wykrywalności wynosiła 0,23 ng/ml dla przeciwciała znakowanego enzymatycznie. Ta wartość była równoważna z konwencjonalnym zestawem ELISA, ale 8 razy szybsza (31 min w porównaniu do 260 min). Zakres wykrywania wynosił 0,23-100 ng/ml. Urządzenie immunowall z przeciwciałem znakowanym enzymem oferuje szybki, czuły, selektywny i prosty system testów immunologicznych do wykrywania prawdziwych próbek H5 AIV w przyszłości.